中心暗场像质量优于暗场像 尼康显微镜的尼康显微镜单品介绍

尼康显微镜的尼康显微镜单品介绍

用于高端生物科学研究领域的新型倒置显微镜系列
TIRF、共聚焦、FRET、光活化和显微注射技术帮助科学家们克服了许多活细胞成像中的困难。所有技术的核心就是Ti，拥有这款强有力的新型倒置显微镜，您可以在尼康CFI60®光学系统的帮助下轻松使用上述技术。Ti系列共有三种型号，改进的系统速度，提升的灵活性和高效多模式特点使Ti成为用于高端研究和活细胞成像的理想系统。
高质量相差图像
尼康世界领先的光学设计者开发了独一无二的外部相差单元。使用这一革新系统，将相差环整合至显微镜主体而不是物镜里，使用者不必使用相差专用物镜来观察相差图像，并可以通过高数值孔径物镜来得到高质量图像。另外使用不带相差环的物镜可以得到“全亮度”的荧光图像。
置于显微镜主体内的相差环
将原本置于相差物镜中的相差环置于显微镜的主体的外部相差单元的光路设计，便于使用者使用高数值孔径物镜得到高分辨率的相差图像。根据所使用的物镜，有四种类型的相差环可供选择（Ti-E/U/S通用）。
超高分辨率
使用尼康的高性能物镜，包括60x和100xTIRF物镜，具有世界最高1.49的数值孔径，并且整合球差校正环，可以得到其它标准相差物镜无法比拟的高分辨率相物基岁差图像。
使用同款物镜得到的“全亮度”荧光图像由于没有相差环导致的光线损失，在同一系统中，不仅可以进行相差观察，还可以得到更明亮的“全亮度”荧光图像、共聚焦图像和TIRF图像。
用水浸物镜来观察相差锋念图像
通过外部相差单元，即使使用水浸物镜也可以得到清晰、高分辨率的相差图像。
用于图像分析的高分辨率图像
由于相差图像与TIRF观察、DIC观察可以使用同样的物镜，得到的图像可用于高精确性数据处理和图像分析，例如TIRF图像的细胞轮廓定义。
多端口分层结构支持高端研究
具有左端口、右端口和底*端口的多图像端口设计可以在每个端口连接一罩睁个相机。另外分层结构的扩展空间设计可以加入一个后端口，这些特点方便用户使用双层荧光滤色块盒和多相机进行图像获取。 * Ti-E/B和Ti-U/B组合可选底端口
后端口确保多相机拍摄
使用可选的后端口设计扩展了图像获取能力。与侧端口结合使用可以用两个相机获取双通道图像。例如当FRET (福斯特共振能量转移)的荧光蛋白之间有观察间隔、CFP和YFP的强度差别很大时，可以通过调节单个相机的灵敏度来得到高信噪比图像进行比较。
分层结构提高可扩展性
Ti采用的分层结构充分利用了无限远光学系统的优势，另外将PFS整合到物镜转换器。可以通过垫高块在光路中引入PFS之外的两个可选部件，利用该系统可以同时使用激光镊、光活化单元和落射荧光装置。每层的电动荧光滤色块盒可以单独控制。
在更宽的波长范围内以更好的性能获得多种荧光染料图像
通过引入870nm的波长阻挡装置，研究者可以使用包括Cy5.5在内的近红外荧光染料。从紫外到红外范围内的光学特性得到提升，可用的物镜数目增加，在大范围的应用中都可以实现焦点稳定，不管是在紫外范围的Ca浓度测量还是红外范围的激光镊。
非凡的快速图像获取
对96孔板进行三通道（双通道荧光和相差）快速拍摄，速度提高2倍以上。
尼康独有的完美调焦系统（PFS）排除焦点漂移
焦点漂移是时间序列观察中最大的障碍。尼康的PFS系统对长时间观察过程中和加药时可能出现的焦点漂移进行校正。即使使用高倍物镜或类似TIRF这样的技术时也可以维持焦点。另外，在物镜转换器上整合PFS有助于节约空间，并不限制Ti的可扩展分层结构。 PFS采用高效光学补偿系统，对Z轴平面进行实时校正。不需要使用PFS时，也可以简单地将其撤出光路。
数字控制集线器显著提升了电动附件的速度
尼康最新研发的数字控制集线器通过减少部件之间的通讯时间，提高各附件的速度，进而显著提高整体的操作速度。 PC控制对Ti的电动部件进行优化，缩短从动作命令到移动之间的反应时间，从而对整体施行高速控制。 通过增加智能固件，电动部件的整体操作时间显著缩短，例如三通道（双通道荧光和相差）连续图像获取需要的总时间大大缩短，减少了对细胞的光毒性。
高速电动控制与图像获取
同步控制若干电动部件，诸如物镜转换器、荧光滤色块、光闸、聚光器转换器和载物台，研究者可以进行多维电动实验。更快的附件运动和图像获取缩短整体的曝光时间，减少相应的光毒性，帮助研究者得到更有意义的数据。
提升每个电动部件的速度
操作和/或转换物镜、滤光块、XY载物台、激发/阻挡滤光片的速度大幅增加，研究者可以专注于观察和图像获取。新研发的控制器可以记录和复制观察条件，实现用鼠标控制载物台，整台显微镜就像研究者眼睛和手的延伸部分。
每种观察方法均采用优化的光学技术，得到完美图像
尼康优化的光学技术提供多种模式观察标本，向研究者呈现细胞的每一个细节。
Nomarski 微分干涉（DIC）
高对比度和高分辨率的平衡对于观察细微结构至关重要。尼康独有的DIC系统即使在低放大倍率下也可以得到高分辨率图像。新型DIC滑块（干）提供高分辨率和高对比度两种选择。滤光块型DIC检偏器可以置于电动滤光块盒内，将DIC观察和荧光观察的切换时间显著缩短。
相差
相差图像观察时可以使用CFI Plan Fluor ADH 100x (Oil)。该物镜与传统相差物镜相比减少了相差图像的光晕，增强了图像的对比度。
暗场
使用高NA的聚光镜可以进行暗场观察。可以对微粒子进行长时间的观察，并避免光漂白。
霍夫曼调制相差（HMC）®
HMC物镜与HMC聚光镜部件组合可以得到类似3D的高对比度、无光晕图像，可以应用于培养在塑料培养皿中的透明样本。
为Ti系列研发的新型物镜
CFI S Plan Fluor ELWD/ELWD相差物镜
新研发的物镜对近紫外（Ca2+）到近红外波长范围内的光都有高通透性，并且改进了色差校正。在多种照明模式下都可以得到高质量无色差的图像。
Plan Apochromat 20x物镜
新型20x物镜加入尼康专有的VC物镜系列，该物镜的轴向色差校正至405nm，是用于共聚焦观察和光活化技术的理想物镜。
提升可操作性
用于电动操作的所有按键和控制转换器设计都非常人性化，研究者可以不受到显微镜操作的影响，专注于研究。
操作按键位于显微镜主体的两侧和前面
荧光滤色块的切换、物镜转换、Z轴粗/微调、PFS开/关控制、透射照明开/关控制都可以通过位于显微镜主体的按键进行快速切换。
新研发的人机学控制器
通过手柄或人机学控制器可以控制高速电动XY载物台和Z轴。
显微镜主体前面的VFD屏幕和操作按键
包括物镜信息在内的显微镜状态和PFS的开/关状态都会显示在VFD屏上。调。
PFS补偿功能
PFS的补偿功能易于控制，只需一个按键就可以切换粗/微调。
远程控制面板和预设按键
通过远程控制面板可以操作显微镜，并确认显微镜目前的状态。另外可以通过预设按键来自动切换观察条件。只需单单一个按键就可以完成从相差到荧光观察的切换。
原创倾斜式设计
将显微镜主体的前部稍稍向后倾斜，操作者眼点与标本之间的距离缩短了约40mm，增强了可操作性。

双目生物显微镜的如何选购

我想大部分用户都关心选择什么样的显微镜才能真正符合我的需求，现在我们主要针对倒置显微镜，来告诉你什么情况下需要用倒置显微镜。一般用户用的样品是在细胞培养板里的或者培养皿的（比如你问题中提到的96孔板），板有一定的厚度，如果这个厚度大于你放大倍数所要求的物距，物镜无法靠近样品，无法观察。这个时候你就要需要用倒置显微镜了。倒置显微镜的优点在于，从上到下的顺序依次是：样品、载物台、物镜。这样物镜可以很接近样品而不会受样品厚度的限制。
那客户最关心倒置显微镜的哪些内容呢！
首先讲讲倒置显微镜的几个主要部分，也是客户在选择时需要考虑芦丛的因素。
1：光学部分：显微镜质量的核心就是其光学部分，也就是目镜和物镜部分。对于物镜来说，一般可以分为几个级别。首先是消色差物镜，使用这种物镜，不是成像所有的地方都清晰，只有视野中央60%左右的范围清晰，外周40%部分会存在一定的缺陷。通常我们会把观察部分放在视野中央，所以并不影响观察。但是如果你想要100%视野没有缺陷的话，就要用平场消色差物镜，相对而言，这种的价格就会高很多，一般是用在医疗和科研方面。还有就是介于两者之间的，也就是半平场消色差物镜。学生用的显微镜选择前面两个级别就可以了。一般的便宜点的物镜均为普通的消色差物镜，成交价格都在8千元左右。好点的就复消色差物镜或是无限远消色差物镜，成交价格在1万多元左右。如果是三目的价格还更高几千元。所以用户选购目镜就比较简单，就是看其视野的大小，推荐用大视野的目镜，因为大视野的目镜相对与一般的具有更大开口，视觉效果更好。不过正常情况下选择倒置显微镜客户用三目的比较多。
2：结构材料：比如说显微镜的机身结构，显微镜的使用寿命很长，有些可以达到10年以上，那么高质量的零部件和严密的装配就成为其使用寿命的保证。因此，应选择具有稳固结实镜架的显微镜，材质最好选择是合金的，可以减少变形。另外载物台的大小也很重要，一般载物台越大的显微镜价格相对会高一些，因为载物台大一些可以放比较大的样口，观察的面积比较大一点，移动它样品比较方便观察。
3：光源部分：显微镜观察可以有明场、暗场、偏光、相差，荧光等光源，不同功能显微镜分别用不同的观察方式，而且作用也不同
明场像（BF）：选用直射电子形成的像（透射束），像清晰。一般明场光源是最普通的光源
暗场像（DF）：选用散射电子形成的像（衍射束），像有畸变、分辨率低裤简。
暗场光源很多客户比较不明白，我们在这里更加深入的说明暗场观察针对具体暗场特性的物质：暗视野观察（Dark field）：暗视野实际是暗场照明发。它的特点和明视野不同，不直接观察到照明的光线，而观察到的是被检物体反射或衍射的光线。因此，视场成为黑暗的背景，而被检物体则呈现明亮的象。
暗视野的原理是根据光学上的丁道尔现象，微尘在强光直射通过的情况下，人眼不能观察，这是因为强光绕射造成的。若把光线斜射它，由于光的反射，微粒似乎增大了体积，为人眼可见。暗视野观察所需要的特殊附件是暗视野聚光镜。它的特点是不让光束由下至上的通过被检物体，而是将光线改变途径，使其斜射向被检物体，使照明光线不直接进入物镜，利用被检物体表面反射或衍射光形成的明亮图象。暗视野观察的分辨率远高于明视野观察，最高达0.02—0.004偏光用于研究所谓透明与不透明各向异性材料的一种光源。凡具有双折射的物质，在偏光观察下就能分辨的清楚，当然这些物质也可用染色法来进行观察，但有些则不可能，而必须利用偏光。一般偏光显微镜全家的5~8千，贵的则两三万，还有购买偏光显微镜的最好采用单色光，因为光的速度，折射率，和干涉现象由于波长的不同而有差异。一般镜检可使用普通光。陪纯樱至于相差光源前面已经做过介绍。
荧光光源：是利用一定波长的光激发标本发射荧光，通过物镜和目镜系统放大以观察标本的荧光图像,因此荧光光源大多数还是荧光显微镜上用的比较多。
4：倒置显微镜的目数：倒置显微镜正常客户用三目的比较多，其实就是双目的，单目的基本上在倒置显微镜上用的很少，应该说几乎没有，因此很多国内的厂家都只有生产双目和三目和，一般双目的倒置显微镜和三目的倒置显微镜价格相差在2千元左右。
以上这些就是客户选购显微镜首要考虑的一些因素，我们讲讲显微镜国内主流厂家的一些产品及价格，还有我们常规给客户配置的显微镜
倒置这一块做的比较好的，还是进口的产品，如果客户有足够经费那最好购买进口的（比如日本奥林巴斯或者日本尼康，德国的CarlZeiss和Leica）如果资金不是很够的情况下，也可以选购国产产品，倒置生物显微镜中国还是有好多生产不错的厂家，比如说重庆光学的倒置显微镜，在生物医学方面的领域比较普遍接受，还有江南永新的，上海光学的上海领成的产品都不错。一般常出售的重庆光学的XDS-1B倒置生物显微镜 成交价格在：0左右，还有江南永新XD-202倒置生物显微镜 直接用户成交价格：0左右进口的产品价格比较低的一般在4万~6万 贵的有8~10万
上海天呈科技有限公司常给客户配置的产品如下 400-700-
XDZ-103CE倒置生物显微镜+C型接口+300万彩色数码摄相头（带测量软件）=0元/台

衍射衬度的特征

衍衬成像，操作上是利用单一透射束通过物镜光栏成明场扮销像，或利用单一衍射束通过物镜光栏成暗场像。近似考虑，忽略双束成像条件下电子在试样中的吸收，明暗场友歼像衬度是互补的。明场像和暗场像均为振幅衬度，即它们反映的是试样下表面处透射束或衍射束的振幅大小分布，而振幅的平方可以作为强度的量度，由此便获得了一幅通过振幅变化而形成衬度变化的图像。
指试样不同部位由于对入射电子作用不同，经成像放大后，在显好缺冲示装置上显示的强度差异。在TEM中，产生这种差异的主要原因是振幅差和相位差，对应的衬度称为振幅衬度和相位衬度。